高效液相色譜儀操作過(guò)程及注意事項(xiàng)
高效液相色譜儀操作是應(yīng)注意什么:
1、液相色譜儀的流動(dòng)相應(yīng)采用色譜純?nèi)軇詽M足要求、避免損壞色譜柱
2、待分析的樣品必須徹底溶解澄清、過(guò)濾,以避免堵塞、損壞色譜柱;
3、液相色譜儀流動(dòng)相需經(jīng)過(guò)濾、除氣后方可使用;
4、嚴(yán)禁使用有污染的水等沖洗色譜柱,避免將互不相溶的溶劑一同進(jìn)入泵內(nèi);
5、液相色譜儀分析完成后,須注意及時(shí)清洗色譜柱和檢測(cè)器的比色池。
高效液相色譜儀的操作過(guò)程如下:
1.翻開(kāi)HPLC工作站(包含計(jì)算機(jī)軟件和色譜儀),銜接好活動(dòng)相管道,銜接檢測(cè)體系。
2.對(duì)抽濾后的活動(dòng)相進(jìn)行超聲脫氣10-20分鐘。
3.過(guò)濾活動(dòng)相,根據(jù)需求挑選不一樣的濾膜。
4進(jìn)入HPLC操控界面主菜單,點(diǎn)擊manual,進(jìn)入手動(dòng)菜單。
5.有一段時(shí)刻沒(méi)用,或許換了新的活動(dòng)相,需求先沖刷泵和進(jìn)樣閥。沖刷泵,直接在泵的出水口,用針頭抽取。沖刷進(jìn)樣閥,需求在manual菜單下,先點(diǎn)擊purge,再點(diǎn)擊start,沖刷時(shí)速度不要超越10ml/min。
6.調(diào)理流量,初度運(yùn)用新的活動(dòng)相,能夠先試一下壓力,流速越大,壓力越大,通常不要超越2000。點(diǎn)擊injure,選用適宜的流速,點(diǎn)擊on,走基線,調(diào)查基線的狀況。
7.規(guī)劃走樣辦法。點(diǎn)擊file,選擇select?users?and?methods,能夠選擇現(xiàn)有的各種走樣辦法。若需樹(shù)立一個(gè)新的辦法,點(diǎn)擊new?method。選擇需求的配件,包含進(jìn)樣閥,泵,檢測(cè)器等,根據(jù)需求而不一樣。選完后,點(diǎn)擊protocol。一個(gè)完整的走樣辦法需求包含:a.進(jìn)樣前的穩(wěn)流,通常2-5分鐘;b.基線歸零;c.進(jìn)樣閥的loading-inject變換;d.走樣時(shí)刻,隨不一樣的樣品而不一樣。
8.進(jìn)樣和進(jìn)樣后操作。選定走樣辦法,點(diǎn)擊start。進(jìn)樣,一切的樣品均需過(guò)濾。辦法走完后,點(diǎn)擊postrun,可記載數(shù)據(jù)和做符號(hào)等。悉數(shù)樣品走完后,再用上面的辦法走一段基線,洗掉剩余物。
9關(guān)機(jī)時(shí),先關(guān)計(jì)算機(jī),再關(guān)液相色譜儀。